在高效液相色谱检测中，对照品纯度直接影响定量分析的准确性，在售后工作中经常遇见因对照品纯度异常导致数据偏差的案例。现从专业角度剖析原因及应对策略：

1，检测波长选择差异

原因：杂质峰与对照品峰有不同的紫外吸收特征，在不同波长下呈现不同的色谱图。
解决方案：选择对照品与杂质具有相似吸收特征的波长，纯度结果会更趋近真实值（如示图选择255nm检测）。

2，空白干扰
原因：部分溶剂在特定波长下有紫外吸收，特别是末端波长下。或溶剂被污染也会出现一些杂峰，导致对照品检测纯度不够。
解决方案：检测对照品时用相同色谱方法检测空白溶剂，扣除空白溶剂中的峰即可排除空白干扰。

3，对照品溶液不稳定
原因：部分对照品固体状态时稳定，但是溶解后却容易降解（如在溶液中存在互变异构或发生水解等化学反应）。
解决方案：找到不稳定的原因，并隔绝不稳定因素（如现配现测，或更换适宜的溶剂。）

4，溶解性影响
原因：部分对照品在当前溶剂下溶解性较差，在溶解时对照品或其杂质溶解不充分，从而导致纯度异常。
解决方案：更换溶解性更好的溶剂、降低配制浓度或添加助溶剂（DMSO或DMF）。
5，样品污染
原因：对照品可能在保存期间、运输期间、取样期间、甚至上机检测期间被不干净的器具、器皿、溶剂等污染，导致纯度不够。
解决方案：尽量避免各个环节污染，如使用干净的器皿、新开封的溶剂，且检测前确保色谱柱、仪器系统已经完全被冲洗干净（可先进空白溶剂以确证）。
6，色谱柱问题
原因：色谱柱柱效下降或色谱柱不适用
解决方案：测试柱效，查看柱效参数是否符合要求。如为柱效下降则更换新的色谱柱；如为色谱柱不适用，可选择具更高选择性的色谱柱，如HILIC、手性柱等。

7，溶剂效应
原因：对照品溶剂强度大于流动相强度，可造成的色谱峰变形、分叉或出现异常峰。
解决方案：使用与流动相初始比例极性相当的溶剂溶解对照品、或降低进样量。

8，样品过载
原因：对照品浓度配制过高，超过色谱柱的载样量，也可能使检测器响应过载，导致纯度结果异常。
解决方案：降低对照品浓度。
9，对照品发生降解
原因：对照品存储条件不当，如光照、温度、湿度或密封性等不适宜会导致降解。
解决方案：使用惰性气体保护，密封包装，避光保存于-20℃或2-8℃环境（视化合物性质而定）。对使用者而言，收到对照品的第一时间按产品说明书保存对照品。
10，基线噪音过大
原因：当基线噪音过大时，易将溶剂峰、系统峰错误积分计入杂质。
解决方案：排除仪器系统干扰和流动相的影响，如检查检测器氘灯能量、流通池污染或气泡、泵污染或泵稳定性、温度稳定性、流动相气泡或均匀性等。
11，洗脱程序不适用
原因：某些极性非常相近的杂质在色谱条件下未分离，如异构体杂质。
解决方案：优化洗脱程序（如改为梯度洗脱、延长洗脱时间、调整有机相比例等）。
12，检测器不适用
原因：化合物因其不同的结构特征，具有不同紫外特征吸收，也适宜不同的检测器（或检测波长），因而可能出现不出峰、峰面积偏低、纯度偏低等情况。
解决方案：选择适宜的检测器，如没有紫外吸收的化合物可以选择蒸发光检测器或者示差折光检测器，或选择适宜的检测波长（参考第一条）。